2004, Número 2
Identificación de Mycoplasma spp en leche bovina con una prueba de inmunoperoxidasa
Infante-Martínez F, Flores-Gutiérrez GH, Lozoya-Chávez J
Idioma: Español/Inglés
Referencias bibliográficas: 23
Paginas: 101-107
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RESUMEN
El propósito de este trabajo fue instrumentar una prueba de inmunoperoxidasa para identificar Mycoplasma spp aislados de leche bovina. Se analizaron 80 muestras de leche infectada de forma natural por diferentes Mycoplasma spp, utilizando la prueba de inmunofluorescencia como estándar de oro. La sensibilidad de la prueba instrumentada fue de seis unidades formadoras de colonias, sin presentarse reacciones cruzadas con los diferentes antisueros, con 100% de sensibilidad y especificidad epidemiológica y valores predictivos, no encontrándose diferencias estadísticas significativas (P › 0.05) entre ambas técnicas. La reproducibilidad de la prueba de inmunoperoxidasa fue alta, obteniendo cuatro veces los mismos resultados; se realizó en menos tiempo que la prueba de inmunofluorescencia, requiriendo sólo de un microscopio simple para leer los resultados y una menor cantidad de antisueros y conjugados. En este estudio la prueba de inmunoperoxidasa mostró tener características diagnósticas similares a la prueba de inmunofluorescencia, es más sencilla y no requiere de equipo sofisticado.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Infante-Martinez F, Aguado SJ, Jasper DE. Mastitis outbreak due to Mycoplasma californicum and Mycoplasma canadense in a commercial dairy herd in the state of Jalisco, Mexico. Rev Latinoam Microbiol 1999;41:117-120.
Jasper DE. Bovine mycoplasmal mastitis. Adv Vet Sci Comp Med 1981;25:121-125.
Jasper DE, Dellinger JD, Rollins MH. Prevalence of mycoplasmal bovine mastitis in California. Am J Vet Res 1979;40:1043-1047.
Jasper DE. Prevalence of mycoplasmal mastitis in the western states. Cal Vet 1980;34:24-26.
Boothby JT, Jasper DE, Rollins MH. Detection of M. bovis specific IgG in bovine serum by enzyme-linked immunosorbent assay. Am J Vet Res 1981;42:1242-1247.
Gourlay RN. Isolation and characterization of mycoplasmas viruses. In: Tully JG, Razin S, editors. Methods in mycoplasmology. New York: Academic Press, 1983:413-420.
Infante Martinez F, Jasper DE, Stott JL, Cullor JS, Dellinger JD. Immunobinding assay for detection of Mycoplasma bovis in milk. Can J Vet Res 1990;54:251-255.
Infante F, Infante F Jr, Flores-Gutierrez GH. Improved immunobinding test using monoclonal antibodies for detection of Mycoplasma bovis in milk. Can J Vet Res 2002;66:282-284.
Baas E, Jasper DE. Agar block technique for identification of mycoplasmas by use of fluorescent antibody. Appl Microbiol 1972;23:1097-1100.
Carrol EJ, Rollins MH, Jasper DE. The immune response of rabbits to 3 strains of M. agalactia var. bovis isolated from mastitis bovine udders. Cornell Vet 1976;66:143-151.
Chavez Gonzalez YR, Ros Bascunana C, Bolske G, Mattsson JG, Fernandez Molina C, Johansson KE. In vitro amplification of the 16sr rRNA genes from Mycoplasma bovis and Mycoplasma agalactiae by PCR. Vet Microbiol 1995;47:183-190.
Clyde A. Mycoplasma pneumonie infection of man. In: Tully JG, Whitcomb RF, editors. The Mycoplasmas. New York: Academic Press, 1979:401-404.
Remington RD, Shchork MA. Statistics with applications to the biological and health sciences. New Jersey: Prentice Hall Inc, 1975.
Heller M, Berthold E, Pfützner H, Leirer R, Sachse K. Antigen capture ELISA using monoclonal antibody for the detection of Mycoplasma bovis in milk. Vet Microbiol 1993;37: 127-133.
Mauch H. Diagnosis of acute respiratory tract infections: serology and new methods. Clin Microbiol Infect 1996;1 Suppl 2:S16-S19.
Verdin E, Saillard C, Labbe A, Bove JM, Kobisch M. A nested PCR assay for the detection of Mycoplasma hyopneumoniae in tracheobronchiolar washings from pigs. Vet Microbiol 2000;76:31-40.
Muenster OA, Ose EE, Matsuoka T. The incidence of Mycoplasma dispar, Ureaplasma and conventional Mycoplasma in the pneumonic calf lung. Can J Comp Med 1979;43:392-398.
Trichard CJ, Basson PA, Van der Lugt JJ, Jacobsz EP. An outbreak of contagious bovine pleuropneumonia in the Owambo Mangetti area of South West Africa/Namibia: microbiological, immunofluorescent, pathological and serological findings. Onderstepoort J Vet Res 1989;56:277-284.
Bencina D, Bradbury JM. Combination of immunofluorescence and immunoperoxidase techniques for serotyping mixtures of Mycoplasma species. J Clin Microbiol 1992;30:407-410.
Gogate A, Deodhar L, Bhatt R, Vaidya P. Mycoplasma hominis infections in female genital tract & use of immunofluorescence for antibody detection. Indian J Med Res 1990;91: 364-367.
Flores-Gutiérrez GH. Desarrollo de una prueba de inmunodot para el diagnóstico de Mycoplasma bovis en semen y tracto reproductor bovino (tesis de doctorado). Victoria (Tamaulipas) México: Univ Autónoma de Tamaulipas, 2001.
Hotzel H, Sachse K. Improvement and acceleration of the diagnosis of contagious bovine pleuropneumonia by direct detection of the microbe using polymerase chain reaction (PCR). Berl Munch Tierarztl Wochenschr 1998;111:268-272.
Kotani H, McGarrity GJ. Identification of mycoplasma colonies by immunobinding. J Clin Microbiol 1986;23:783-785.