2008, Número 2
<< Anterior Siguiente >>
Rev Inst Nal Enf Resp Mex 2008; 21 (2)
Detección y tipificación del virus sincitial respiratorio mediante la técnica RT- PCR anidada en pacientes con infección respiratoria aguda
Mojica MF, Escobar MF, Escalante MP, Jaramillo CA, Delgado MP
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 17
Paginas: 92-98
Archivo PDF: 92.56 Kb.
RESUMEN
Antecedentes: El virus sincitial respiratorio (VSR) es uno de los principales agentes etiológicos de la infección respiratoria aguda (IRA), considerada como una de las causas más importantes de morbimortalidad infantil en el mundo. El diagnóstico de la entidad y, específicamente, la detección y caracterización de ciertos agentes usando los métodos convencionales presenta algunas falencias que pruebas moleculares como el PCR de transcripción reversa (RT-PCR) intentan resolver.
Objetivo: Desarrollo de un protocolo de RT-PCR anidada para la detección y tipificación del VSR en muestras respiratorias.
Métodos: Se incluyeron hisopados y aspirados nasofaríngeos provenientes de enfermos con clínica compatible con IRA, reportados como positivos o negativos para el VSR por inmunofluorescencia. Se aplicó la técnica molecular RT-PCR seguida de un PCR anidada, para la detección y tipificación del VSR usando como blanco de amplificación el gen de la nucleocápside, que diferencia los tipos A y B gracias al tamaño de sus amplicones.
Resultados: Se procesaron en total 30 muestras, de las cuales 2 resultaron positivas para el VSR tipo A, 16 positivas para el VSR tipo B, y 7 mostraron una infección mixta por los tipos A y B; 5 fueron negativas para VSR.
Conclusión: Los resultados sugieren que el protocolo de RT-PCR aquí presentado ofrece una alternativa rápida y eficaz para la detección y tipificación del VSR a partir de muestras respiratorias.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Secretaría Distrital de Salud de Bogotá. Boletín ERA No. 21. Consultado: 02-VI-2005. Secretaría Distrital de Salud. Disponible en: http://www.saludcapital.gov. co/secsalud/boletines_epidemiologicos/ERA/ERA%20(PDF)/BOLETIN%20ERA%20No%2021.pdf
Nokso-Koivisto J, Hovi T, Pitkäranta A. Viral upper respiratory tract infections in young children with emphasis on acute otitis media. Int J Pediatr Otorhinolaryngol 2006;70:1333-1342.
Bellau-Pujol S, Vabret A, Legrand L, et ál. Development of three multiplex RT-PCR assays for the detection of 12 respiratory RNA viruses. J Virol Methods 2005; 126:53-63.
Sarmiento L, Chacón D, Valdivia A, Savón C, Goyenechea A. Aplicación de la reacción en cadena de la polimerasa para la identificación del virus sincitial respiratorio. Rev Cubana Med Trop 1997;49:21-23.
Syrmis MW, Whiley DM, Thomas M, et ál. A sensitive, specific, and cost-effective multiplex reverse transcriptase-PCR assay for the detection of seven common respiratory viruses in respiratory samples. J Mol Diagn 2004;6:125-131.
Fajardo LF, Borrero I. Infección respiratoria aguda. Estudio epidemiológico de una cohorte I. Etiología. Colombia Médica 1994;25:18-23.
Falsey AR, Formica MA, Walsh EE. Diagnosis of respiratory syncytial virus infection: comparison of reverse transcription-PCR to viral culture and serology in adults with respiratory illness. J Clin Microbiol 2002;40:817-820.
Wright PF, Cutts FT. Generic protocol to examine the incidence of lower respiratory infection due to respiratory syncytial virus in children less than five years of age. World Health Organization 2000. Consultado: 27-II-2007. Organización Mundial de la Salud. Disponible en: http://www.who.int/vaccine_research/documents/en/syncytial_virus.pdf
Stockton J, Ellis JS, Saville M, Clewley JP, Zambon MC. Multiplex PCR for typing and subtyping influenza and respiratory syncytial viruses. J Clin Microbiol 1998; 36:2990-2995.
Archundia SFJ, Alejandre CJE, Cabello GC, Rosete ODP, Manjarrez ZME. Incorporación de la técnica de RT-PCR para la detección del virus sincitial respiratorio. Rev Inst Nal Enf Resp Mex 2000;13:145-152.
Rodrigues JC, da Silva Filho LV, Bush A. Etiological diagnosis of pneumonia-a critical view. J Pediatr (Rio J) 2002;78(Suppl 2):129-140.
Osiowy C. Direct detection of respiratory syncytial virus, parainfluenza virus, and adenovirus in clinical respiratory specimens by a multiplex reverse transcription-PCR assay. J Clin Microbiol 1998;36:3149-3154.
Fan J, Henrickson KJ. Rapid diagnosis of human parainfluenza virus type 1 infection by quantitative reverse transcription-PCR-enzyme hybridization assay. J Clin Microbiol 1996;34:1914-1917.
Coggins WB, Lefkowitz EJ, Sullender WM. Genetic variability among group A and group B respiratory syncytial viruses in a children’s hospital. J Clin Microbiol 1998;36:3552-3557.
Sato M, Saito R, Sakai T, et ál. Molecular epidemiology of respiratory syncytial virus infections among children with acute respiratory symptoms in a community over three seasons. J Clin Microbiol 2005;43:36-40.
Falsey AR, Formica MA, Treanor JJ, Walsh EE. Comparison of quantitative reverse transcription-PCR to viral culture assessment of respiratory syncytial virus shedding. J Clin Microbiol 2003;41:4160-4165.
Rowensztein H, Demirdjian G, Rodríguez J. Carga de enfermedad y costos asociados a las internaciones por infección respiratoria aguda en niños. Arch Argent Pediatr 2007;105:5-11. Accesible en: http://www.scielo.org.ar/pdf/aap/v105n1/v105n1a03.pdf