2006, Número 3
<< Anterior Siguiente >>
An Med Asoc Med Hosp ABC 2006; 51 (3)
Contaminación por micoplasmas en cultivos celulares
Rivera-Tapia JA, Muñoz ZG, Román MC
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 16
Paginas: 109-112
Archivo PDF: 91.21 Kb.
RESUMEN
Los cultivos celulares frecuentemente se contaminan con diferentes especies de micoplasmas, alterando el crecimiento celular, los patrones enzimáticos, la composición de la membrana e induciendo anormalidades cromosómicas. Esta situación señala la necesidad de establecer un control de calidad para la detección de contaminación en cultivos celulares por micoplasmas.
Objetivo: Detección de micoplasmas en cultivos celulares provenientes de distintos laboratorios biomédicos.
Material y métodos: Los cultivos celulares que se utilizaron provenían de distintos laboratorios biomédicos. Los cultivos celulares fueron crecidos en ausencia de antibióticos y lavados con una solución de PBS. La monocapa celular se obtuvo por medio de un raspado y resuspendida en 2 mL de caldo SP-4. Las muestras incluidas en la detección por cultivo microbiológico fueron analizadas mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
Resultados: El estudio microbiológico mostró que 62.5% de los cultivos fueron positivos para el aislamiento de micoplasmas y 37.5% negativos. Por medio de la prueba de PCR se amplificó el fragmento específico (301 pb) para el género micoplasma.
Conclusión: Debido a que los micoplasmas frecuentemente contaminan cultivos celulares, se sugiere la detección continua de estos microorganismos, principalmente en laboratorios biomédicos.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Barile MF. Mycoplasma-tissue cell culture interactions. In: Tully JG, Whitcomb RF (ed). The mycoplasmas. New York: Academic Press, 1979; 425-474.
McGarrity GJ, Kotani H. Cell culture mycoplasmas. In: Razin S, Barile MF (ed). The mycoplasmas. New York: Academic Press, 1985; 353-390.
Stanbridge EJ. Mycoplasmas and cell cultures. Bacteriol Rev 1971; 35: 206-227.
Rivera-Tapia JA, Cedillo RL, Gil JC. Some biological features of Mollicutes. Rev Latinoam Microbiol 2002; 44: 53-57.
Del Giudice RA, Gardella RS, Hopps HE. Cultivation of formerly noncultivable strains of Mycoplasma hyorhinis. Curr Microbiol 1980; 4: 75-80.
Hopps HE, Meyer BC, Barile MF, Del Giudice RA. Problems concerning “non-cultivable” mycoplasma contaminants in tissue cultures. Ann NY Acad Sci 1973; 225: 265-276.
Gobel UB, Stanbridge E. Cloned mycoplasma ribosomal RNA genes for the detection of mycoplasma contamination of tissue cultures. Science 1984; 226: 1211-1213.
Johansson KE, Johansson I, Gobel UB. Evaluation of different hybridization in cell cultures. Mol Cell Probes 1990; 4: 33-42.
Razin S, Gross M, Wormser M, Pollack Y, Glaser G. Detection of mycoplasmas infecting cell cultures by DNA hybridization. In Vitro 1984; 20: 404-408.
Kuppeveld FJM, Johansson KE, Galama JMD, Kissing J, Bolske G, Van Der Logt JTM, Melchers WJG. Detection of mycoplasma contamination in cell cultures by a mycoplasma group-specific PCR. Appl Environ Microbiol 1994; 60: 149-152.
Spaepen M, Angulo AF, Marynen P, Cassiman JJ. Detection of bacterial and mycoplasma contamination in cell cultures by polymerase chain reaction. FEMS Microbiol Lett 1992; 99: 89-94.
Bolske G. Survey of mycoplasma infection in cell cultures and a comparison of detection methods. Zentralbl Bakteriol Mikrobiol 1988; Hyg A269: 331-340.
Shidu K, Rashidbaigi A, Testa D, Liao MJ. Competitor internal standards for quantitative detection of mycoplasma DNA. FEMS Microbiol Leet 1995; 128: 207-212.
Hay RJ. Operator induced contamination in cell culture systems. Dev Biol Stand 1991; 75: 193-204.
Lincoln CK, Gabridge MG. Cell culture contamination: Source, consequences, prevention and elimination. Methods Cells Biol 1998; 57: 49-65.
McGarrity GJ. Detection of mycoplasmas infection in cell cultures. Adv Cell Cult 1982; 2: 99-131.