2012, Número 2
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Biotecnol Apl 2012; 29 (2)
Una variante microanalítica del SOS Chromotest para la evaluación genotóxica de productos naturales y sintéticos
Cuétara EB, Álvarez A, Alonso A, Vernhe M, Sánchez-Lamar A, Festary T, Rico J
Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 23
Paginas: 108-112
Archivo PDF: 118.63 Kb.
RESUMEN
Una variante microanalítica del SOS Chromotest para la evaluación genotóxica de productos naturales y sintéticos. Los agentes que pueden dañar al ADN in vivo tienen la potencialidad de tener efectos adversos sobre la salud humana. Los mismos pueden inducir mutaciones transmisibles y cáncer. El ensayo SOS Chromotest es un ensayo basado en una fusión transcripcional de un gen SOS, sfi A y el gen de la β-galactosidasa, así la actividad enzimática indica el nivel de inducción de la respuesta SOS response y puede estimarse el daño al ADN producido por mutágenos físicos y químicos. Nosotros presentamos y evaluamos en este trabajo una variante microanalítica del ensayo SOS Chromotest original para la detección de la genotoxicidad de muestras pigmentadas. Introdujimos dos modificaciones principales: cambiamos sustratos que desarrollan color por otros que desarrollan fluorescencia y trabajamos a escala micro-analítica. La concentración óptima de sustrato para la β-galactosidasa utilizada fue de 1.8 mM y el tiempo de reacción fue de 40 minutos. Esta variante detectó eficientemente la genotoxicidad de mutágenos conocidos y de extractos naturales pigmentados. Los resultados son discutidos en relación a las ventajas que ofrece trabajar a escala microanalítica, reducción de costos, automatización de las lecturas y su utilidad para tamizar una larga variedad de muestras.
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