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ISSN 0864-4551 (Impreso)

2015, Número 4

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Biotecnol Apl 2015; 32 (4)


Desarrollo de un método para la detección de tres mutaciones frecuentes en el gen CFTR mediante PCR en tiempo real alelo-específica

Figueredo-Lago JE, Armas-Cayarga A, González-González YJ, Collazo-Mesa T, García RI, Perea-Hernández Y, Santos-González EN

Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 22
Paginas: 4301-4306
Archivo PDF: 528.41 Kb.


RESUMEN

La fibrosis quística (FQ) es una enfermedad autosómica recesiva provocada por mutaciones en el gen regulador de la conductancia transmembranal de la fibrosis quística (CFTR). Se desarrolló un método para detectar tres mutaciones frecuentes en el gen CFTR (F508del, 3120 + 1G › A and N1303K), mediante PCR en tiempo real alelo-específica (ASPCR). Se evaluaron por triplicado las muestras de ADN genómico de nueve pacientes que portaban las mutaciones CFTR mencionadas, y se determinó la variación de Ct (ΔCt) entre las reacciones de ASPCR para los genotipos mutado y salvaje, expresada como media ± la desviación estándar. La especificidad de los cebadores por los alelos se confirmó mediante análisis de Fusión de Alta Resolución (HRM). Los resultados validaron la utilidad del método implementado para el genotipado, y se identificaron las tres mutaciones, según se pudo corroborar al comparar los resultados obtenidos con las determinaciones hechas mediante el panel comercial StripAssay (Viennalab, Austria). El método descrito mostró la selectividad y la especificidad necesarias para la pesquisa clínica poblacional de la FQ, principalmente de la mutación F508del, dada su alta prevalencia entre la población cubana.


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