Salgado-Albarrán M, Herrera-Díaz J, Dinkova TD

Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 20
Paginas: 43-51
Archivo PDF: 741.69 Kb.

RESUMEN

Un grupo de proteínas de almacenamiento muy abundantes en la semilla de cereales son las prolaminas que se caracterizan por contener muchos residuos de prolina en su secuencia. En cebada, las prolaminas son denominadas hordeínas. El propósito de este estudio fue obtener los patrones proteicos de bandeo mediante la técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida bajo condiciones desnaturalizantes para, hordeínas de semilla seca de cinco variedades mexicanas de cebada. Asimismo, se obtuvieron los patrones de hordeínas en malta procesada a partir de cuatro variedades mexicanas y una variedad canadiense (Metcalfe). A continuación, algunas de las bandas diferenciales fueron identificadas mediante espectrometría de masas (EM) utilizando distintos protocolos de digestión. En los patrones de semilla seca se encontraron diferencias entre las variedades mexicanas para las bandas correspondientes a un peso molecular de 100 kDa, 65 kDa y algunas de 37-45 kDa. En el caso de la malta, los patrones de las variedades mexicanas fueron muy contrastantes entre sí, así como con el observado en Metcalfe, lo que sugiere que el procesamiento de hordeínas durante la germinación y el secado de la malta depende de cada variedad. Finalmente, en la identificación por EM se demostró que el uso de digestión con tripsina es adecuado para distinguir hordeínas B y γ en malta, mientras que el uso de digestión secuencial con quimotripsina y tripsina favorece la identificación de hordeínas C en semilla seca.

REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)

1. Baik, B. K. & Ullrich, S. Barley for food: Characteristics, improvement, and renewed interest. J. Cereal Sci. 48, 233- 242 (2008).

2. Shewry, P. R., Napier, J. A. & Tatham, A. S. Seed Storage Proteins: Structures and biosynthesis. Plant Cell. 7, 945-956 (1995).

3. Colgrave, M. L., Goswami, H., Howitt, C. A. & Tanner, G. J. What is in a Beer? Proteomic Characterization and Relative Quantification of Hordein (Gluten) in Beer. J. Proteome Res. 11, 386-396 (2012).

4. Briggs, D. E., Boulton, C. A., Brookes, P. A. & Stevens, R. Brewing, Science and Practice (CRC Press, Boca Raton Fl., USA, 2004).

5. Legge, W. G. et al. AC Metcalfe barley, cultivar description. Can. J. Plant Sci. 83, 381-384 (2002).

6. Fernández-Vera, Z. Nuevas variedades de cebada cervecera adaptadas a México. (Impulsora Agrícola, México, 2013).

7. Shewry, P. R. & Tatham, A. S. The prolamin storage proteins of cereal seeds: structure and evolution. Biochem. J. 267, 1-12 (1990).

8. Rechinger, K. B., Simpson, B.J., Svendsen, I. & Cameron-Mills, V. A role for γ3 hordein in the transport and targeting of prolamin polypeptides to the vacuole of developing barley endosperm. The Plant J. 4, 841-853 (1993).

9. Wallace, J. C., Lopes, M. A., Paiva, E. & Larkins, B.A. New methods for extraction and quantification of zeins reveal a high content of gamma-zeins in modified opaque-2 maize. Plant Physiol. 92, 191-196 (1990).

10. Yin, T. Q., Ma, D. Q. & Ding, Y. Analysis of genetic diversity of hordein in wild close relatives of barley from Tibet. Theor. Appl. Genet. 107, 837-842 (2003).

11. Agrawal, G. & Thelen, J. A high resolution two dimensional gel-and Pro-Q DPS-Based proteomics workflow for phosphoprotein identification and quantitative profiling. Methods Mol. Biol. 3, 834-841 (2009).

12. Echart-Almeida, C. & Cavalli-Molina, S. Hordein polypeptide patterns in relation to malting quality in Brazilian barley varieties. Pesq. Agropec. Bras. 36, 211-217 (2001).

13. March, T. J., et al. Identification of proteins associated with malting quality in a subset of wild barley introgression lines. Proteomics. 12, 2843-2851 (2012).

14. Rahman, S., Shewry, P. R., Forde, B. G., Kreis, M. & Miflin, B. J. Nutritional control of storage-protein synthesis in developing grain of barley (Hordeum vulgare L.). Planta. 159, 366-371 (1983).

15. Qi, J. C., Zhang, G. P. & Zhou, M. X. Protein and hordein content in barley seeds as affected by nitrogen level and their relationship to beta-amylase activity. J. Cereal Sci. 42, 102-107 (2006).

16. Qi, J. C. et al. Protein and hordein fraction content in barley seeds as affected by sowing date and their relations to malting quality. J. Zhejiang Univ. Sci. 11, 1069-1075 (2005).

17. Flodrová, D., Ralplachta, J., Benkovská, D. & Bobálová, J. Application of proteomics to hordein screening in the malting process. Eur. J. Mass. Spectrom. 18, 323-332 (2012).

18. Jin, B. et al. Investigation of the relationship of malt protein and beer haze by proteome analysis. J. Food Process. Press. 36, 169-175 (2012).

19. Berne, L. J. Endoproteases of barley and malt. J. Cereal Sci. 42, 139-156 (2005).

20. Osman, A. M. et al. Characterization and Assessment of the Role of Barley Malt Endoproteases During Malting and Mashing. J. Inst. Brew. 108, 62-67 (2002).