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2014, Número 4

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Biotecnol Apl 2014; 31 (4)


Aplicación de un ensayo colorimétrico de proliferación celular en CTLL-2 para la evaluación de antagonistas de IL-15

Rodríguez-Álvarez Y, Gerónimo-Pérez H, Garay-Pérez H, Castro-Velazco J, García-Illera G, Santos-Savio A

Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 28
Paginas: 291-296
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RESUMEN

La expresión no regulada de la interleucina-15 (IL-15) se ha asociado con el desarrollo y patogénesis de varias enfermedades autoinmunes e inflamatorias. Se han desarrollado numerosos agentes que inhiben la actividad de la IL-15 como posibles fármacos para el tratamiento de estas patologías. Nosotros hemos trabajado en dos estrategias para inhibir la actividad de la IL-15, un péptido (llamado P8) que se une a la subunidad alfa del receptor de IL-15 y una vacuna basada en la inmunización activa con IL-15 humana (IL-15h). La actividad biológica de los antagonistas de IL-15 se midió mediante el ensayo de proliferación en CTLL-2, una línea celular que depende de IL-2/IL-15 para proliferar. En este trabajo se definieron las condiciones del ensayo para determinar la concentración inhibitoria media máxima (CI50) del péptido P8 y los títulos de neutralización de los sueros de monos inmunizados con la vacuna anti-IL-15. La especificidad del ensayo para la IL-15 se demostró usando anticuerpos específicos anti-IL-15 y anti-IL-2. También se examinó la especificidad de los antagonistas de IL-15 en presencia de IL-2, y se demostró que ni el péptido ni los sueros inhiben la proliferación celular inducida por IL-2 humana. Finalmente, se evaluó el efecto de anticuerpos comerciales anti-IL-15h y de sueros de ratones inmunizados con IL-15h sobre la IL-15 murina (IL-15m). Ni los anticuerpos ni los sueros inhiben la IL-15m, lo que indica que los modelos murinos no son útiles para evaluar la efectividad de la vacuna anti-IL-15h. Este ensayo permitió evaluar diferentes estrategias que inhiben la actividad de la IL-15 para su futuro desarrollo como fármacos.


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