Liotta DJ, Cabanne G, Campos R, Andrés TS

Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 23
Paginas: 82-87
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RESUMEN

Numerosos protocolos propuestos para la detección del virus del Dengue requieren de un tiempo prolongado de ejecución o bien presentan dificultades metodológicas con muestras de mosquitos. Por este motivo, se desarrolló un ensayo de RT-PCR y RFLP con el objeto de disponer de un sistema molecular sensible y específico, capaz de detectar potenciales brotes epidémicos de Dengue y serotipos virales circulantes en mosquitos Aedes aegypti capturados a campo en la región nordeste de Argentina. El protocolo original de RT-PCR propuesto por Sudiro et al para la detección viral en suero humano fue optimizado para muestras de mosquitos. Las modificaciones se realizaron a nivel de las etapas de extracción-purificación y ciclado térmico. El producto genérico de 230 bp fue autenticado por RFLP y secuenciación cíclica. Los resultados mostraron que debido a la naturaleza genérica de los cebadores empleados, ciertas regiones genómicas del vector podrían ser co-amplificadas, considerando por ello necesario la validación del producto mediante RFLP. Bajo estas condiciones de trabajo, el método propuesto puede ser empleado en procedimientos de tamizaje viral genérico con muestras de vector Aedes aegypti, generando un 99.52% de negativos confirmados (207/208 muestras analizadas).

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