2009, Número 4
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Bioquimia 2009; 34 (4)
Validación de dos variantes de la técnica rep-PCR para la tipificación molecular de aislados de Enterobacter cloacae productores de β-lactamasas de espectro extendido
Castro-Alarcón N, Alonso-Morales A, Silva-Sánchez J, Armenta-Solís A
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 27
Paginas: 165-174
Archivo PDF: 269.43 Kb.
RESUMEN
Enterobacter cloacae es un importante patógeno oportunista, causante de infección nosocomial, del cual el número de cepas multi-resistentes se ha incrementado en la última década. La electroforesis en gel por campos pulsados (PFGE) para la detección de la clonalidad es considerada el estándar de oro, no obstante los métodos basados en PCR son más baratos, fáciles de realizar y proveen resultados rápidos. El objetivo fue validar los resultados obtenidos de la tipificación molecular de aislados de
E. cloacae mediante dos variantes de la técnica de amplificación de secuencias repetidas (rep-PCR), comparándolos con los resultados de la electroforesis en gel de campos pulsados (PFGE). Se analizaron 26 cepas, a las cuales se les realizó un tamiz para confirmar la producción de
β-lactamasas de espectro extendido (BLEE) y sus respectivos puntos isoeléctricos (pIs). Las cepas fueron tipificadas por la PFGE utilizando la enzima
XbaI y por rep-PCR utilizando iniciadores correspondientes a las secuencias REP y ERIC. Los aislados productores de BLEEs mostraron multi-resistencia, los pIs más frecuentes fueron de 5.4 (88.4%) y de 8.2 (76.9%). Epidemiológicamente todos los aislados fueron claramente discriminados por ambos métodos. Las variantes rep-PCR agruparon a los aislados en 18 grupos clonales y la PFGE en 20 grupos clonales. El poder de discriminación mostrado por las dos variantes rep-PCR fue de 0.97, mientras que el poder de discriminación para la PFGE fue de 0.98. La rep-PCR puede ser una herramienta molecular alternativa en el laboratorio de microbiología para una rápida tipificación de aislados de
E. cloacae en la investigación de brotes.
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