2006, Número 12
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Ginecol Obstet Mex 2006; 74 (12)
Desarrollo y validación de un modelo de cultivo in vitro para el estudio de la diferenciación del trofoblasto humano
Martínez FA, Beltrán MJ, Ortega AA, Vadillo OF
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 15
Paginas: 657-665
Archivo PDF: 476.03 Kb.
FRAGMENTO
Objetivos: desarrollar un método para aislar células de citotrofoblasto humano y evaluar su capacidad invasora y de diferenciación.
Tipo de estudio: biomédico experimental.
Material y método: se aislaron citotrofoblastos de placentas sanas de embarazos a término por digestión con dispasa y purificación en gradiente de densidad. Se evaluó la pureza por inmunorreactividad a la citoqueratina 7 y la invasividad de las células del citotrofoblasto en Matrigel. La actividad enzimática se determinó por medio de zimografía y la hCG secretada se cuantificó por ELISA. La expresión de integrinas alfa 1 y alfa 5 se evaluó por inmunohistoquímica.
Resultados: se obtuvieron citotrofoblastos con pureza del 97%, que se diferenciaron, de manera espontánea, a un sincitio después de cuatro días; se acompañó de producción creciente de hCG. La invasividad de los citotrofoblastos fue máxima los primeros dos días, cuando su fenotipo fue mononuclear y coincidió con la secreción de pro-MMP-9, y disminuyó con el tiempo de cultivo. La inmunorreactividad a las integrinas alfa 1 y alfa 5 se observó en las células del citotrofoblasto con el fenotipo mononuclear y fue menor en células con fenotipo de sincitio.
Conclusiones: se desarrolló un modelo in vitro que replica eventos del desarrollo temprano de la placenta, que emulan la etapa de invasión y de diferenciación del citotrofoblasto. Este modelo tiene utilidad potencial en el estudio de los mecanismos de daño en la preeclampsia.
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