Sánchez-Gómez I, Gonzáles-Pelayo GL, Santibáñez-Escobar LP, Gaona-Bernal J, Villa-García Torres LS, Márquez-García E, Avelar-Rodríguez FJ, Marino-Marmolejo EN, Flores-Hernández FY

Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 35
Paginas: 16-27
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RESUMEN

La investigación sobre células troncales en regeneración de tejidos dañados ha crecido debido al potencial de mejorar diversas afecciones. Las células troncales de piezas dentales son una opción para ser utilizadas en ingeniería de tejidos, requiriendo contar con procedimientos estandarizados para su procesamiento con el fin de lograr un adecuado aislamiento y cultivo. Objetivo: Realizar una evaluación de distintos procedimientos para aislamiento, cultivo y propagación de células troncales de pulpa dental (DPSC por sus siglas en inglés). Materiales y Métodos: Estudio cuasiexperimental con muestreo no probabilístico para aislamiento de DPSC, donadas bajo consentimiento informado. Se probaron diversos métodos; para el acceso a la cámara pulpar se probó la perforación mecánica utilizando fresadoras y piezas de mano de alta velocidad, además de un método de corte a nivel de tercio cervical dividiendo corona y raíz utilizando una pieza de mano de baja velocidad con disco de diamante. Se extrajo la pulpa dental disgregando las células por diversos métodos enzimáticos procediendo al cultivo en monocapa para el aislamiento. La fenotipificación celular fue por citometría de flujo detectando marcadores mesenquimales (CD44, 73, 90, 105), además se realizaron ensayos de multidiferenciación hacia linajes osteogénico, condrogénico y adipogénico. Por último, las DPSC se criopreservaron en nitrógeno líquido. Resultados: Procedimiento eficaz para la obtención, aislamiento y proliferación de DPSC, confirmando con morfología, expresión de marcadores mesenquimales, multipotencialidad y adhesión en plástico. Conclusión: Se logró estandarizar un protocolo de aislamiento de DPSC (transporte, procesamiento de piezas dentales, aislamiento, cultivo y proliferación), observando mejor aislamiento de DPSC a partir de molares con ápice inmaduro, provenientes de pacientes con promedio de edad de 25 años.

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