Viera ODR, Rodríguez MC, Zhurbenko R

Language: Spanish
References: 28
Page: 36-47
PDF size: 151.80 Kb.

ABSTRACT

Introduction: Species of the genus Aeromonas are a current public health problem, for they are the etiological agents responsible for the growing incidence of diarrheal diseases requiring medical care. Conventional procedures for their diagnosis are very complicated, laborious and time-consuming. A new methodology based on the use of chromogenic culture media allows diagnostic simplification and acceleration, yielding highly specific results.
Objective: Study the effect of combining several selective agents for gram-positive microorganisms upon an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species.
Methods: Assessment was conducted of the inhibiting effect of combined selective agents (sodium deoxycholate (0.05-0.2 g·L^-1), bile salts (0.65 g·L^-1), brilliant green (0.025-0.03 g·L^-1), crystal violet (0.001-0.01 g·L^-1) and sodium sulfite (0.8 g·L^-1) on gram-positive microorganisms, as well as their capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species. The base used was the CromoGen AGN formulation without sodium deoxycholate.
Results: Productivity values for the media CromoCen AE and CromoCen AGN based on inoculation of 1.5 × 10² CFU·mL^-1 were 116.8 % and 23.9 % for A. hydrophila, 100.8 % and 3.95 % for A. caviae, 93.6 % and 28.8 % for A. bestiarium, 85.1 % and 66.12 % for A. culicicola, 116.7 % and 59.2 % for A. veronii, 86.56 % and 13.2 % for A. popoffi, 94.8 % and 11.25 % for A. trota, and 103.9 % and 2.8 0% for A. eucrinophila. The new chromogenic composition enabled differentiation of microorganisms based on their cultural characteristics: color, shape, surface, colony borders and environmental proteolysis.
Conclusions: Combination of various selective agents for the inhibition of grampositive microorganisms led to an increased capacity for recovery, quantification and differentiation of Aeromonas species.

REFERENCES

1. Quiroga M, Lezcano MT, Martín-Talavera B. Aeromonas spp. Involucradas en infecciones extraintestinales diagnosticadas en centros de salud de Posadas, Misiones. Rev Cienc Tecnol; 2010. p. 12.

2. Janda JM, Abbott SL. The genus Aeromonas: Taxonomy, Pathogenicity and Infection. Clin Microbiol Rev. 2010;23(1):35-73.

3. Castro-Escarpulli G, Aguilera-Arreola MG, Hernández-Rodríguez CH, Arteaga- Garibay RI, Carmona-Martínez AA, Pérez-Valdespino A, et al. La identificación genética de Aeromonas, una realidad y una necesidad para la microbiología diagnóstica. Bioquímica. 2003;28(4):11-8.

4. Cabrera RLE, Castro EG, Ramírez AM, Llop HA, Llanes CR, Castañeda EN, et al. Aislamiento e identificación de especies pertenecientes a los géneros Aeromonas, Vibrio y Plesiomonas procedentes de muestras extraintestinales en Cuba. Rev Chil infect. 2007;24(3):204-8.

5. Bravo L, Fernández A, Núñez F, Rivero LA, Ramírez M, Águila A, et al. Aeromonas spp asociada a enfermedad diarreica aguda en Cuba: estudios de casos y controles. Rev Chil infect. 2012;29(1):44-8.

6. Acosta-García J, Aguilar-García CR. Infección de tejidos blandos por Aeromonas salmonicida. Primer reporte de caso en México y revisión de la bibliografía. Med Int Méx. 2014;30:221-6.

7. dos Santos PA, Pereira AC, Ferreira AF, de Mattos Alves MA, Rosa AC, Freitas- Almeida AC, et al. Adhesion, invasion, intracellular survival and cytotoxic activity of strains of Aeromonas spp. in HEp-2, Caco-2 and T-84 cell lines. Antonie Van Leeuwenhoek. 2015;107(5):1225-36.

8. Aguilera-Arreola MG, Portillo-Muñoz MI, Rodríguez-Martínez C, Castro-Escarpulli G. Usefulness of Cromogenic CromoCen® AGN agar medium for the identification of the genus Aeromonas: Assessment of faecal samples. J Microbiol Meth. 2012;90:100-4.

9. Díaz-Pérez M, Zhurbenko R, Fuentes-Barcenas M, Hernández-Cortez C, Castro- Escarpulli G, Rodríguez Martínez C, et al. Evaluation of an alternative chromogenic method for the detection and enumeration of enterococci in waters. Afr J Microbiol Res. 2014;8(7):652-8.

10. Zhurbenko R, Rodríguez Martínez C, Jesús Quezada Muñiz VJ, Tsoraeva A, Ribeiro da Silva R, Lobaina Rodríguez T, et al. Empleo de un nuevo método cromogénico para la identificación simultánea de patógenos en alimentos. En: Ponencia presentada en el Taller Internacional de Ciencias Farmacéuticas y Alimentarias (TNCFA). Cuba; 2012.

11. Rodríguez-Martínez C, Quesada-Muñiz VJ, Zhurbenko R. CNB, assignee. Medio de cultivo para la detección de microorganismos Gram-negativos. Patente de Brasil No. PI 0113717-4; 2014.

12. ISO/TS 11133-2. Microbiology of food and animal feeding stuffs -Guidelines on preparation and production of culture media- Part 2: Practical guidelines on performance testing of culture media. Geneva (Switzerland): ISO; 2003.

13. González MI, Torres T, Chiroles S, Manafi M. Medios de cultivo fluorogénicos y cromogénicos y su evaluación en aguas de consumo y costeras. Hig Sanid Ambient. 2009;9:422-30.

14. Sánchez Millares M, Arrazcaeta Pérez OL, Carillo Salazar M, Gerónimo Otero O, Tsoraeva A, Díaz Pérez M, et al. Resultados de ensayos de dos medios CromoCen AGN y CromoCen ECCS en el análisis de aguas residuales: Laboratorio Provincial de Control y Calidad de las Aguas. Centro Nacional de Biopreparados; 2002.

15. Herzberg M, Sherman SR. Use of deoxycholate in separation of in vivo growing salmonella typhimurium from tissue febris. J Bacteriol. 1966;92(4):1270.

16. Tsoraeva A, Muñoz del Campo JL, Zhurbenko R, Rodríguez Martínez C, González- -Ortega M. Evaluación del medio CromoCen ECCS para la detección e identificación de bacterias enteropatógenas. Rev Cubana Med Trop. 2008;6(2)111-7.

17. Anexo I Medios de cultivo. México: Facultad de Química. 2005 [citado 29 Sep de 2015]. Disponible en: http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/AnexoMEdiosdeCultivo_19095.pdf

18. Adams E. The antibacterial action of crystal violet. J Pharm Pharmac. 1967;19(12):821-6.

19. Stearn EW, Stearn AE. Conditions and reactions defining dye bacteriostasis. J Bact. 1926;11:345-57.

20. Hernández Montealegre L. Salud y Medicina. Colombia, Tolima: Universidad de Medicina; 2013 [citado 26 Sep de 2015]. Disponible en: http://es.slideshare.net/lauram9104/agentes-qumicos-16073956

21. Factores químicos para el control de microorganismos. México. 2007 [citado 6 Oct de 2015]. Disponible en: https://www.google.com.cu/?gws_rd=cr,ssl&ei=DIsWVonYBITLeLvpuUg#q=Factore s+quimicos+para+el+control+de+microorganismos&start=10

22. Ulloa JA. Frutas autoestabilizadas en el envase por la tecnología de obstáculos. México: Universidad Autónoma de Nayarit. 2007 [citado 24 Sep de 2015]. URL disponible en: https://books.google.com.cu/books?id=d9f5Gko6V7kCC&printsec=frontcover&hl=e s#v=onepage&q&f=false

23. Fernández Abreu A, Bravo Fariñas L, Ramírez Álvarez M, Fernández Andreu C, Ledo Ginarte Y, Correa Martínez Y, et al. Aislamiento e identificación de Aeromonas y Plesiomonas en el embalse "Niña Bonita", Ciudad de La Habana, Cuba. Rev Cubana Med Trop. 2008;60(2):184-6.

24. Zhurbenko R, Rodríguez Martínez C. Bases nutritivas para el cultivo de los microorganismos: Parte 2. Principales indicadores de calidad. Salud(i)Ciencia. 2009;16(6):645-8.

25. Safari R, Motamedzadegan A, Ovissipour M, Regenstein JM, Gilberg A, Rasco B, et al. Use of hydrolysates from yellowfin tuna (Thunnus albacares) heads as a complex nitrogen source for lactic acid bacteria. Food Bioprocess Technol. 2012;5:73-9.

26. Fallah M, Barham S, Javadian SR. Fish peptone development using enzymatic hydrolysis of silver carp by-products as a nitrogen source in Staphylococcus aureus media. Food Sci Nutr. 2015;3(2):153-7.

27. Viera Oramas DR, Rodríguez Martínez C, Zhurbenko R, Cabrera González AL, Lobaina Rodríguez T. Study of recovery and differentiation of Aeromonas spp. with different diagnosticians. En: Ponencia presentada en el XVI International Scientific Congress CNIC. Cuba; 2015.

28. Orenga S, James AL, Manafi M, Perry JD, Pincus DH. Enzymatic substrates in microbiology. J Microbiol Meth. 2009;79:139-55.