2000, Number 4
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Vet Mex 2000; 31 (4)
Comparison between two different antibody sources for the development of radioimmunoassays to measure plasmatic levels of testosterone
Rangel PLE, Perera MG, Lassala IA, Zarco L
Language: English/Spanish
References: 30
Page: 278-285
PDF size: 67.10 Kb.
ABSTRACT
En el presente trabajo se compararon el suero de conejo y la yema de huevo como fuentes biológicas de anticuerpos antitestoterona para su uso en métodos de radioinmunoanálisis (RIA). Los resultados indican que la yema de huevo de gallinas inmunizadas no es una fuente adecuada de anticuerpos antitestosterona, ya que aparentemente dichos anticuerpos intervienen en el proceso del desarrollo folicular u ovulación, inhibiendo la postura e impidiéndose su recuperación. Asimismo, en el caso del suero de conejos, fue posible obtener y purificar anticuerpos antitestosterona con los cuales se desarrolló un RIA de fase líquida para medir los niveles plasmáticos de testosterona en diferentes especies animales. Los anticuerpos mostraron alta especificidad, y presentaron una reacción cruzada de 5.84% con dihidrotestosterona y 0.72% con androstenediona, estradiol y 17-hidroxiprogesterona. La sensibilidad al 90% de unión fue de 39.6 pg/ml. La recuperación del sistema fue de 90.5% con el estándar medio y 95.8% con el bajo. El rendimiento final del anticuerpo correspondió a 126.083 mg, que sirven para analizar 1.6 x 105 muestras. Se concluye que la yema de huevo no puede ser utilizada como una alternativa al suero de conejos para la producción de anticuerpos antitestosterona, a diferencia de lo que ocurre con otras hormonas esteroides.
REFERENCES
Abraham G, Garza R. Radioimmunoassay of steroids. In: Abraham GE, editor. Handbook of radioimmunoassay. New York: Morton K. Schwartz, 1977.
Schade R, Pfister C, Halatsch R, Henklein P. Policlonal IgY antibodies from chicken egg yolk: an alternative to the production of mammalian IgG type antibodies in rabbits. Altern Lab Anim 1991;19:403-419.
Leslie GA, Clem LW. Phylogeny of immunoglobulin structure and function. III Immunoglobulins of the chicken. J Exp Med 1969;130:1337-1352.
Ambrosius H, Hadge D. Chicken immunoglobulins. Vet Immunol Immunopathol 1987;17:57-67.
Montes P, Murcia M, Zarco Q. Producción de anticuerpos antiprogesterona a partir de yema de huevo de gallinas y del suero sanguíneo de conejos, para ser utilizados en radioinmunoanálisis. Vet Méx 1994;25:117-125.
Svendsen L, Crowley A, Stodulski G, Hau J. Antibody production in rabbits and chickens immunized with human IgG. A comparison of titre and avidity development in rabbit serum, chicken serum and egg yolk using three different adyuvants. J Immunol Methods 1996;191:113-120.
Rangel PL, Perera MG, Lassala IA, Zarco QL. Desarrollo de un método de radioinmunoanálisis para cortisol, utilizando anticuerpos obtenidos y purificados de la yema de huevo de gallinas inmunizadas. Vet Méx 1999;30:289-295.
Bauwens R, Devos M, Kint J, De Leenher A. Chicken egg yolk and rabbit serum compared as sources of antibody for radioimmunoassay of 1,25-dihydroxyvitamin D in serum plasma. Clin Chem 1988;34:2153-2154.
Larsson A, Sjöquist J. Chicken antibodies: a tool to avoid false positive results by rheumatoid factor in the latex fixation tests. J Immunol Methods 1988;108:205-210.
Benson HN, Brumfield HP, Pomeroy BS. Requirement of avian C1 for fixation of Guinea pig complement by avian antibody-antigen complex. J Immunol 1961;87:63-68.
Amyx HL. Control of animal pain and distress in antibody production and infectious disease studies. J Am Vet Med Assoc 1987;191:1287-1293.
Broderson JR. A retrospective review of lessons associated with the use of Freund’s adyuvant. Lab Anim Sci 1989;39:400-405.
Vaitukaitis J, Robbins B, Nieschlag E, Ross G. A method for producing specific antisera with small doses of immunogen. J Clin Endocrinol 1971;33:988-991.
Munro C, Stabenfeldt G. Development of a microtitre plate enzyme immunoassay for the determination of progesterone. J Endocrinol 1984;101:41-49.
IAEA. Laboratory training manual on radioimmunoassay in animal reproduction. Technical reports series No. 233. Vienna, Austria: FAO, International Atomic Energy Agency, 1984.
Garvey S, Cremer E, Sussdort H. Methods in immunology. 3rd ed. London (UK): WA Benjamington, 1979.
Svendsen L, Crowley A, Ostergaard H, Stodulski G, Hau J. Development and comparison of purification strategies for chicken antibodies from egg yolk. Lab Anim Sci 1995;45:89-93.
Nicoll SC, Licht P. Evolutionary biology of prolactin and somatotropins. II. Electrophoretic comparison of tetrapod somatotropins. Gen Comp Endocrinol 1971;17:490-507.
Bedolla TN, Ulloa-Aguirre A, Landeros VJ, Pérez-Palacios G. Análisis de datos y control de calidad en el radioinmunoanálisis. I. Guía para la evaluación de resultados. Rev Invest Clin 1984;36:179-192.
Ermeling B, Steffen E, Fish R, Hook R. Evaluation of subcutaneous chambers as alternative to conventional methods of antibody production in chickens. Lab Anim Sci 1992;42:402-407.
Sturkie PD. Avian physiology. 4th ed. New York: Springer-Verlag, 1986.
Armstrong DG. Ovarian aromatase activity in the domestic fowl (Gallus domesticus). J Endocrinol 1984;100:81-86.
Porter TE, Hargis BM, Silsby JL, El Halawani ME. Differential steroid production between theca interna and theca externa cells: a three-cell model for follicular steroidogenesis in avian species. Endocrinology 1989;125:109-116.
Scanes CG, Mazelic E, Kavanagh E, Merrill G, Rabbi J. Distribution of blood flow in the ovary of the domestic fowl (Gallus domesticus) and changes after prostaglandin F2a treatment. J Reprod Fertil 1982;64:227-231.
Otani H, Matsumoto K, Saeki A, Hosono A. Comparative studies on properties of hen egg yolk IgY and rabbit serum IgG antibodies. Lebensm Wiss Technol 1991;24:152-158.
Tizard I. Inmunología Veterinaria. 3ª ed. México (DF): Interamericana, 1989.
Prat F, Carrillo M, Mones A. R.I.A. de esteroides plasmáticos. Invest Pesq Barc 1986;50:279-295.
Fletcher RF. Lecture notes on endocrinology. 4th ed. Oxford (UK): Blackwell Scientific Publications, 1987.
Pineda MH. Reproducción del macho. En: MacDonald L, editor. Endocrinología veterinaria y reproducción. México (DF): Interamericana, 1989.
Libertun C. Radioinmunoanálisis. Fundamentos y aplicaciones. Buenos Aires, Argentina: López Libreros Editores, 1980.