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2020, Número 3

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VacciMonitor 2020; 29 (3)


Expresión recombinante en Saccharomyces boulardii de la subunidad A del pili corregulado con la Toxina (TcpA) de Vibrio cholerae O1

Awad S, Al-Ahmer SD, Salih SM

Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 20
Paginas: 136-142
Archivo PDF: 812.44 Kb.


RESUMEN

La vacunación se considera una medida complementaria para prevenir y controlar el cólera, por lo tanto, se necesitan preparaciones vacunales alternativas a las existentes. El Pili corregulado con la toxina, es parte del regulón de virulencia toxR, y es necesario para la colonización en la mucosa intestinal. Para expresar la proteína tcpA de Vibrio cholerae en Saccharomyces boulardii, se construyó el plásmido de expresión pYES2 insertando el gen tcpA obtenido a partir de aislamientos locales de Vibrio cholerae El Tor Inaba. La nueva construcción se transfirió a las células de Saccharomyces boulardii y se indujo la expresión del gen tcpA a partir del promotor GAL1 mediante la adición de galactosa al medio. El análisis mediante SDS-PAGE y Western blot demostró la presencia de TcpA en levaduras. Los resultados demostraron que Saccharomyces boulardii es un hospedero prometedor para expresar el gen tcpA de Vibrio cholerae como el primer paso en el intento de producir una vacuna oral contra Vibrio cholerae.


REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)

  1. World Health Organization [Internet]. Ginebra: WHO; 2019. Newsroom. Fact-sheets. Cholera. Available form: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/cholera. (Accessed online: January 17,2019).

  2. Health cluster Iraq. Wash cluster. Iraq Health and WASH Cluster Acute Diarrheal Disease (including Cholera) Preparedness and Response Plan [Internet]. New York; 2018. Available form: https://reliefweb.int/report/iraq/iraq-health-and-wash-cluster-acute-diarrheal-disease-including-cholera-preparedness-and. (Accessed online: December 26,2018).

  3. Benenson AS, Joseph PR, Oseasohn RO. Cholera vaccine field trials in East Pakistan: 1. Reaction and antigenicity studies. Bull World Health Organ.1968;38(3):347-57.

  4. Bishop AL, Camilli A. Vibrio cholerae: lessons for mucosal vaccine design. Expert Rev Vaccine.2011;10(1):79-94.

  5. Kelesidis T, Pothoulakis C. Efficacy and safety of the probiotic Saccharomyces boulardii for the prevention and therapy of gastrointestinal disorders. Ther Adv Gastroenterol.2012;5(2):111-25.

  6. Sazawal S, Hiremath G, Dhingra U, Malik P, Deb S, Black RE. Efficacy of probiotics in prevention of acute diarrhoea: a metaanalysis of masked, randomised, placebo-controlled trials. Lancet Infect Dis. 2006;6:374-82.

  7. Douradinha B, Reis VC, Rogers MB, Torres FA, Evans JD, Marques Jr ET. Novel insights in genetic transformation of the probiotic yeast Saccharomyces boulardii. Bioengineered.2014; 5(1):21-9.

  8. Vohra A, Satyanarayana T. Probiotic yeasts. In: Satyanarayana T, Johri BN, Prakash A, editors. Microorganisms in sustainable agriculture and biotechnology. Dordrecht: Springer; 2012.p. 411-33

  9. Liu JJ, Kong II, Zhang GC, Jayakody LN, Kim H, Xia PF, et al. Metabolic engineering of probiotic Saccharomyces boulardii. Appl Environ Microbiol.2016; 82:2280-7.doi:10.1128/AEM.00057-16.

  10. Khatri I, Tomar R, Ganesan K, Prasad GS, Subramanian S. Complete genome sequence and comparative genomics of the probiotic yeast Saccharomyces boulardii. Sci Rep. 2017; 7(1):371.doi:10.1038/s41598-017-00414-2.

  11. Krebs SJ, Taylor RK. Protection and attachment of Vibrio cholerae mediated by the toxin-coregulated pilus in the infant mouse model. J. Bacteriol. 2011; 193(19):5260-70.

  12. Forbes BA, Sahm DF, Weissfeld AS. Study guide for Bailey & Scott’s diagnostic microbiology. Saint Louis: Elsevier Mosby;2007.

  13. Kaysner CA, DePaola A, Jones J. Bacteriological Analytical Manual (BAM) Chapter 9: Vibrio. FDA;2004. Available form: https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-chapter-9-vibrio.

  14. Goforth JB, Walter NE, Karatan E. Effects of polyamines on Vibrio cholerae virulence properties. PLoS One.2013; 8(4):e60765.doi:10.1371/journal.pone.0060765.

  15. Hudson LE, Fasken MB, McDermott CD, McBride SM, Kuiper EG, Guiliano DB, et al. Functional heterologous protein expression by genetically engineered probiotic yeast Saccharomyces boulardii. PloS One.2014;9(11):e112660. doi:10.1371/journal.pone.0112660.

  16. Benatuil L, Perez JM, Belk J, Hsieh CM. An improved yeast transformation method for the generation of very large human antibody libraries. Protein Eng Des Sel. 2010; 23(4):155-9.

  17. Sambrook J, Russell DW. Molecular cloning: A laboratory manual. New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press; 2001.

  18. Mahmood T, Yang PC. Western blot: technique, theory, and trouble shooting. N Am J Med Sci.2012;4:429-34.doi:10.4103/1947-2714.100998.

  19. Lim JG, Jin HS. Heterologous expression of cholera toxin B subunit in Saccharomyces cerevisiae. Biotechnol Bioprocess E. 2008; 13:598-605.

  20. Bagherpour G, Ghasemi H, Zand B, Zarei N, Roohvand F, Ardakani EM, et al. Oral administration of recombinant Saccharomyces boulardii expressing ovalbumin-CPE fusion protein induces antibody response in mice. Front microbiol. 2018; 9:723.doi:10.3389/fmicb.2018.00723.




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