medigraphic.com
ISSN 1561-3054 (Digital)

2015, Número 2

<< Anterior Siguiente >>

Rev Cubana Med Trop 2015; 67 (2)


Evaluación de diferentes muestras para la detección molecular de Mycobacterium leprae en Cuba

Ruiz-Fuentes JL, Diaz-Garcia A, Suárez MO, Torres P, Acosta SL

Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 17
Paginas: 193-201
Archivo PDF: 117.17 Kb.


RESUMEN

Introducción: en la actualidad, la principal estrategia para controlar la infección por Mycobacterium leprae es la detección precoz y la multiterapia. El objetivo del presente estudio fue evaluar la utilidad del empleo de diferentes muestras clínicas en el diagnóstico molecular de la infección por M. leprae.
Métodos: se evaluaron 22 pacientes con clínica sugestiva de lepra. Se tomaron muestras de linfa de cuatro puntos (ambos lóbulos auriculares y ambos codos) recogidas en una lámina porta objetos (lámina de baciloscopía) y en un hisopo, además muestra de hisopado nasal, muestra de sangre total y de tejido de la lesión. Las muestras se analizaron mediante baciloscopía, histología y PCR según correspondió en cada caso. Por otro lado, para determinar la sensibilidad y especificidad del método, se realizó un estudio de casos y controles en el que se emplearon 40 láminas de baciloscopías negativas de pacientes con lepra paucibacilar y 40 láminas negativas de personas sin lepra.
Resultados: el 54,5% de los pacientes resultó positivo por baciloscopía. Solo en el 41% de los pacientes la histología tuvo resultados concluyentes de lepra. En el 100% de los pacientes se detectó la presencia de ADN de M. leprae a partir de la lámina de baciloscopía y el hisopado de linfa. En el 95,45 % de los pacientes se pudo amplificar la secuencia diana a partir de la sangre total y solo en el 31,8% de los pacientes el hisopado nasal resultó positivo. El estudio de casos y controles mostró que la sensibilidad y especificidad de la PCR respecto al diagnóstico convencional fue de 100%.
Conclusión: el diagnóstico de M. leprae mediante PCR, es de gran utilidad cuando las técnicas convencionales no son concluyentes. La lámina de baciloscopía y el hisopado de linfa constituyen las muestras clínicas más útiles para la confirmación molecular de la infección por M. leprae.


REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)

  1. OMS: Weekly Epidemiological Record, Global Leprosy situation. 2012;34.

  2. Kamble R, Shinde V, Madhale S, Kamble A, Ravikumar B, Jadhav R. Extraction and detection of Mycobacterium leprae DNA from ZNCF-stained skin smear slides for better identification of negative skin smears. Indian Journal of Medical Microbiology. 2010;28(1):57-9.

  3. MINSAP. Programa de control de Lepra. 2 ed. La Habana: Editorial Ciencias Médicas;1999;1-2.

  4. Donoghue H, Holton J, Spigelman M. PCR primers that can detect low levels of Mycobacterium leprae DNA. J Med Microbiol. 2001;50(2):177-82.

  5. MINSAP. Lepra. Normas técnicas para el control y tratamiento. Editorial Ciencias Médicas 2008.

  6. Ridley D. Histological classification and the immunological spectrum of leprosy. Bull World Health Organ. 1974;51(5):451-65.

  7. Beyene D, Aseffa A, Harboe M, Kidane D, Macdonald M, Klatser P, et al. Nasal carriage of Mycobacterium leprae DNA in healthy individuals in Lega Robi village, Ethiopia. Epidemiol Infect. 2003 131(2):841-8.

  8. Cardona-Castro N, Beltrán-Alzate J, Manrique-Hernández R. Survey to identify Mycobacterium leprae-infected household contacts of patients from prevalent regions of leprosy in Colombia. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2008;103(4):332-6.

  9. Torres P, Camarena J, Gomez J, Nogueira J, Gimeno V, Navarro J, et al. Comparison of PCR mediated amplification of DNA and the classical methods for detection of Mycobacterium leprae in different types of clinical samples in leprosy patients and contacts. Lepr Rev. 2003;74(1):18-30.

  10. Patrocínio L, Goulart I, Goulart L, Patrocínio J, Ferreira F, Fleury R. Detection of Mycobacterium leprae in nasal mucosa biopsies by the polymerase chain reaction. FEMS Immunol Med Microbiol. 2005;44:311-6.

  11. Martinez T, Figueira M, Costa A, Gonçalves M, Goulart L, Goulart I. Oral mucosa as a source of Mycobacterium leprae infection and transmission and implications of bacterial DNA detection and the immunological status. Clin Microbiol Infec. 2011;17:1653-8.

  12. de Wit M, Douglas J, McFadden J, Klatser P. Polymerase chain reaction for detection of Mycobacterium leprae in nasal swab specimens. J Clin Microbiol. 1993;31(3):502-6.

  13. de Almeida E, Nóbrega Martinez A, Câmara Maniero V, Sales A, Duppre N, Sarno E, et al. Detection of Mycobacterium leprae DNA by Polymerase Chain Reaction in the Blood and Nasal Secretion of Brazilian Household Contacts. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2004;99(5):509-12.

  14. Araújo S, Lobato J, de Melo Reis E, Bernardes Souza D, Gonçalves M, Vieira Costa A, et al. Unveiling healthy carriers and subclinical infections among household contacts of leprosy patients who play potential roles in the disease chain of transmission Mem Inst Oswaldo Cruz, Rio de Janeiro. 2012;107

  15. Rao R, Mohan V, Shenoi S. Bacteremia in leprosy. Journal of Pakistan Association of Dermatologists. 2007;17:14-5.

  16. Sigit Prakoeswa C. Detection of Mycobacterium leprae DNA in Blood of the Subclinical Leprosy. Media Folia Medica Indonesiana. 2007;43(2):64-7.

  17. Wen Y, Xing Y, Yuan L, Liu J, Zhang Y, Li H. Whole-blood nested-PCR amplification of M. leprae-specific DNA for early diagnosis of leprosy. Am J Trop Med Hyg. 2013;88(5):918-22.




2020     |     www.medigraphic.com