2014, Número 3
<< Anterior Siguiente >>
Rev Cubana Med Trop 2014; 66 (3)
Obtención de la sublínea celular CLA-HT. Estudio de su sensibilidad para el aislamiento y multiplicación de los virus del dengue
Morier DL, López-Santa CDI, Álvarez M, Caballero LY, Mendoza LD
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 19
Paginas: 424-432
Archivo PDF: 168.71 Kb.
RESUMEN
Introducción: en el diagnóstico de dengue es importante la determinación del
serotipo viral. A pesar de existir otros métodos, el aislamiento viral en cultivos de
células y la identificación por la técnica de inmunofluorescencia siguen siendo muy
utilizados. Por lo tanto, la búsqueda de sistemas celulares más sensibles ha sido un
tema reiterado durante muchos años para el virus dengue y otros agentes.
Objetivo: obtener una sublínea celular a partir del clon CLA-1 (
Aedes pseudoscutellaris) que crece a 28 oC, capaz de multiplicarse a 33 oC (CLA-HT) y evaluar su utilidad para el aislamiento y la identificación de los virus del dengue.
Métodos: a partir del clono CLA-1 de la línea celular AP-61(
Aedes pseudoscutellaris) se obtuvo por selección una cepa o sublínea celular CLA-HT capaz de crecer a 33 °C. Se estudió su sensibilidad para la multiplicación de los 4 serotipos del virus del dengue y su eficiencia para el aislamiento directo de sueros
de pacientes en fase aguda de la enfermedad, ambos comparativamente con la línea C6/36HT (
A. albopictus).
Resultados: la sublínea CLA-HT permitió el crecimiento de los 4 serotipos del virus dengue aunque para algunos requirió más tiempo que la C6/36 HT. Para el
aislamiento a partir de muestras de sueros colectadas de individuos en fase aguda, la sublínea CLA-HT detectó el virus en el 40 % de las muestras, mientras que C6/36 detectó el virus en el 50 %.
Discusión: CLA-HT es capaz de detectar todos los serotipos del virus dengue a partir de las 96 horas pos inoculación, por lo que es útil para la investigación como sistema alternativo y su eficiencia de aislamiento directo es buena para aplicar en grandes brotes. Además, la principal ventaja es que es posible utilizarla para
proporcionar una respuesta rápida a situaciones emergentes en laboratorios de escasos recursos, ya que no precisa de condiciones de incubación con CO
2.
Conclusiones: se obtuvo una sublínea CLA-HT a partir de la línea CLA-1 capaz de crecer a 33 oC, la cual detecta los 4 serotipos del virus dengue. Su eficiencia de aislamiento es ligeramente menor que la sublínea C6/36 HT, pero se puede utilizar como sistema alternativo para el aislamiento de los virus dengue sobre todo en laboratorios con bajos recursos que no cuenten con condiciones óptimas de incubación.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Pan American Health Organization. First noted appearance of dengue virus serotypes in each country of the Americas. [Sitio en Internet]. [citado 13 de junio de 2009]; Division of Disease Prevention and Control. Disponible en: http://www.paho.org/English/HCP/HCT/dengue_firstapp.xls
Guzmán MG, Kourí G. Dengue haemorrhagic fever integral hypothesis: confirming observations, 1987-2007. Trans R Soc Trop Med Hyg. 2008;102(6):522-3.
Sing KRK. All culture derived from larvae of Aedes aegyptis (L). Current Science. 19, Oct. S 1967, p 506-8.
Sudeep AB, Parashar D, Jadi Rs, Basu A, Mokaski CH, Arankalle VA, et at. Establishment and characterization of a new Aedes aegypti (L) (Diptera: Lulicidae) cell line with special emphasis on virus susceptiblilty. In Vitro Cell. Dev. Biol. Animal. 2009;45;491-5.
Varma MG, Pudney M, Leake CJ. Cell lines from larvae of Aedes (Stegomyia) malayensis Colless and Aedes (S) pseudoscutellaris (Theobald) and their infection with some arbovirosis. Trans R. Soc Trop. Med. Hyg. 1974;68:374-82.
Igarashi A. Isolation of a Singh's Aedes Albopictus cell clone sensitive to dengue and chikungunya viruses. J Gen Virol. 1978;40:531-44.
Metselaar D, Grainger CR, Oei KG, Reynolds DG, Pudney M, Leake CJ, et al. An outbreak of type 2 dengue fever in the Seychelles, probable transmitted by Aedes albopictus (Skuse). Bull World Health Organ. 1980;58(6):937-43.
Morier L, Castillo A, Rodríguez R, Guzmán MG. Utilidad de la línea celular CLA-1 para el aislamiento del virus dengue. Rev Cubana Med Trop. 1992;47: 217-8.
Sing KRK. A culture derived from larvae of Aedes aegypti (L). Current Science. 19, Oct. S 1967;p506-8.
Caceda E, Kochel T. Application of modified Shell vial culture produces for Arbovirus detection. American Embassy Nacional Medical Research Center Detachment, Lima. Perú. PloS ONE, Oct, 2002(10).
Ribas Antúnez M, Girón B, Monsalvez I, Morier L, Acosta G, Tejero Y, et al. Comparison of a modified shell vial culture procedure with conventional mouse inoculation for rabies virus isolation. 2013. Mem Inst Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro; Vol. 108(2):255-256.
Yamagishi H. Modified method for the preperation of antigen for the indirect fluorescent antibody technique with Japanese encephalitis virus. Kitasato arsh Exp. Med. 1972;50(3-4):67-78.
Morier L, Camacho Daría E, Guzmán MG. Comportamiento biológico de 3 cepas del virus dengue 2 en líneas celulares de mosquitos. Rev. Cubana Med. Trop. 2000;52(3):215-9
Rodríguez-Roche R, López Matilla L, Alvarez Vera M, Morier Díaz L, Guzmán Tirado MG. Propiedades biológicas de cepas de virus dengue serotipo 2 aisladas durante la epidemia en Santiago de Cuba, 1997. Rev Cubana Med Trop. [Internet]. 2011 Dic [citado 2014 Abr 14]; 63(3): 211-2190. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_attext&pid=S0375- 07602011000300003&lng=es.
Morier L, Alemán MR, Castillo A, Pérez V. Estudio preliminar de la línea celular AP-64 (Aedes pseudoscutellans) para la multiplicación de los virus dengue 1 y 2. Rev Cubana Med Trop. 1991;43(3):156-61.
Guzmán Tirado MG. Treinta años después de la epidemia cubana de dengue hemorrágico en 1981. Rev Cubana Med Trop. [Internet]. 2012 Abr [citado 2014 Abr 14];64(1):5-14. Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0375- 07602012000100001&lng=es.
Guzmán MG, Vázquez S. Apuntes sobre el diagnóstico de laboratorio del virus dengue. Rev Cubana Med Trop. 2002;54(3):180-88.
Camacho D, Bracho-Labadie M, Rodríguez F, Morier L, Guzmán MG, Comach G. Propiedades Biológicas de cepas de Dengue 2 aisladas de pacientes con FD y FHD. Rev. Cub Med Trop. 2009;61(3).
Leland DS, Ginocchio C. Role of Cell Culture for Virus Detection in the Age of Technology. Clinical Microbiology Reviews. Jan. 2007;p.49-78.