Cabrera AY, Martínez GD, Pérez CER, Márquez PGJ, Feble ML

Idioma: Ingles.
Referencias bibliográficas: 14
Paginas: 14-18
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RESUMEN

El gen que codifica para la ADN polimerasa I de Thermus aquaticus (Taq Pol I) se clonó en el vector plasmídico pOSEX4 bajo el control del promotor osmoinducible proU y consecuentemente expresado en la cepa Escherichia coli MKH13. La actividad de la enzima fue determinada por la cuantificación de 35S dATP incorporado y por PCR. La expresión de la Taq pol I en este sistema, la cual está bajo el control de la presión osmótica del medio de crecimiento, se analizó en diferentes medios y concentraciones de cloruro de sodio, utilizado como inductor. Un estudio de los efectos de la osmolaridad en el crecimiento y en los niveles de expresión de Taq pol muestra que un incremento en la concentración de cloruro de sodio limita el crecimiento. Se observó una actividad máxima a 0.25 M de NaCl, a valores mayores de osmolaridad se encontró un inesperado decrecimiento de la actividad. Este es el primer reporte sobre el uso del vector pOSEX para la expresión de proteínas heterólogas, siendo muy ventajoso para una forma de inducción regulada, no tóxica y económicamente factible en procesos biotecnológicos con el solo uso de NaCl u otro osmolito no permeable.

REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)

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