2012, Número 3
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Rev Cubana Med Trop 2012; 64 (3)
Incremento de la sensibilidad analítica del sistema FasciDIG® para el diagnóstico de Fasciola hepatica
Marcet SR, Figueredo PM, Núñez FFA, Rojas RL, Sarracent PJ
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 18
Paginas: 335-341
Archivo PDF: 72.31 Kb.
RESUMEN
Introducción: la fasciolosis en Cuba es una enfermedad enzoótica en el ganado y en los últimos años existe un incremento en el número de casos en humanos. El diagnóstico coproparasitológico de la fasciolosis es poco sensible y laborioso, por lo que es importante el uso de los métodos inmuno-enzimáticos sobre todo aquellos que son capaces de detectar antígenos de este parásito en las heces. En el Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" se cuenta con un sistema de detección de antígenos denominado FasciDIG® con una sensibilidad de 10 ng/mL.
Objetivo: aumentar la sensibilidad del FasciDIG® realizando modificaciones a este método diagnóstico.
Métodos: en un sistema simulado se evaluaron FasciDIG® y FasciDIG modificado, utilizando diluciones seriadas dobles de antígenos a concentraciones desde 1 000 ng/mL hasta 1,95 ng/mL. El FasciDIG se modificó utilizando como segundo anticuerpo el obtenido en conejos contra antígenos de excreción-secreción de Fasciola hepatica conjugado con biotina seguido de la adición de un conjugado extravidina-peroxidasa comercial. Las heces se colectaron del recto de 96 reses destinadas para sacrificio y se evaluaron por ambos métodos. Se calculó el índice de concordancia Kappa entre ambos sistemas.
Resultados: el límite de detección obtenido para el FasciDIG® fue de 3,9 ng/mL mientras que el FasciDIG modificado detectó hasta 1,95 ng/mL. El índice de concordancia calculado entre los dos ensayos fue de 0,6238, que corresponde a un índice de acuerdo sustancial o bueno.
Conclusiones: el método FasciDIG modificado resultó tener una mayor sensibilidad analítica que el FasciDIG® y puede ser un complemento para el diagnóstico de la fasciolosis. Se debe incrementar el número de muestras y determinar la sensibilidad y especificidad utilizando la técnica de sedimentación copa-cónica seriada como regla de oro.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Mas-Coma S. Human fascioliasis. En: Cotruvo JA, Dufour A, Rees G, Bartram J, Carr R, Cliver DO, et al., editors. Waterborne zoonoses: Identification, causes and control. London, UK: World Health Organization (WHO); 2004. p. 305-22.
Mas-Coma S. Epidemiology of fascioliasis in human endemic areas. J Helminthol. 2005;79:207-16.
Karahocagil MK, Akdeniz H, Sunnetcioglu M, Cicek M, Mete R, Akman N, et al. A familial outbreak of fascioliasis in Eastern Anatolia: a report with review of literature. Acta Trop. 2011;118:177-83.
Maguire JH. Schistosomiasis. En: Mandel GL, Bennett JE , Dolin R, editors. Trematodes and other flukes. New York: Churchill Livingstone; 2005: 3276-85.
Charlier J, Meulemeester L, Claerebout E, Williams D, Vercruysse J. Qualitative and quantitative evaluation of coprological and serological techniques for the diagnosis of fasciolosis in cattle. Vet Parasitol 2008;153:44-51.
Spithill TW SP, Sexton LS, Bozas E, Morrison CA, Creaney J, Parsons JC. Devellopment of vaccine against of Fasciola hepatica. In: JPD, editors. Fasciolosis. Ireland: Wallingford: CAB International; 1999. p. 377-410.
Rojas L, Vazquez A, Domenech I, Robertson LJ. Fascioliasis: can Cuba conquer this emerging parasitosis? Trends Parasitol. 2010;26:26-34.
Espino AM, Marcet R, Finlay CM. Fasciola hepatica: detection of antigenemia and coproantigens in experimentally infected rats. Exp Parasitol. 1997;85:117-20.
Espino AM, Millan JC, Finlay CM. Detection of antibodies and circulating excretory-secretory antigens for assessing cure in patients with fascioliasis. Trans R Soc Trop Med Hyg. 1992;86:649.
Espino AM, Marcet R, Finlay CM. Detection of circulating excretory secretory antigens in human fascioliasis by sandwich enzyme-linked immunosorbent assay. J Clin Microbiol. 1990;28:2637-40.
Mezo M, Gonzalez-Warleta M, Carro C, Ubeira FM. An ultrasensitive capture ELISA for detection of Fasciola hepatica coproantigens in sheep and cattle using a new monoclonal antibody (MM3). J Parasitol. 2004;90:845-52.
Espino AM, Diaz A, Perez A, Finlay CM. Dynamics of antigenemia and coproantigens during a human Fasciola hepatica outbreak. J Clin Microbiol. 1998;36:2723-6.
Espino AM. Inmunodianóstico de la Fasciolosis humana y su aplicación en brotes epidémicos [Doctoral thesis]. La Habana: Departamento de Parasitología, Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí"; 1997. p. 65.
Gupta A, Dixit AK, Dixit P, Mahajan C, Sharma RL. Evaluation of dipstick-ELISA using 28 kDa Fasciola gigantica cathepsin l cysteine proteinase (FgCL3) for serodiagnosis of fasciolosis in naturally infected goats. Vet Parasitol. 2011;176:165-9.
Rigby AS. Statistical methods in epidemiology. v. Towards an understanding of the kappa coefficient. Disabil Rehabil. 2000;22:339-44.
Crowther JR. ELISA Theory and Practice. Totowa, New Jersey: Human Press; 1995. 1-219 p.
Ubeira FM, Muino L, Valero MA, Periago MV, Perez-Crespo I, Mezo M, et al. MM3-ELISA detection of Fasciola hepatica coproantigens in preserved human stool samples. Am J Trop Med Hyg. 2009;81:156-62.
Espinoza JR, Maco V, Marcos L, Saez S, Neyra V, Terashima A, et al. Evaluation of Fas2-ELISA for the serological detection of Fasciola hepatica infection in humans. Am J Trop Med Hyg. 2007;76:977-82.