2004, Número 2
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Bioquimia 2004; 29 (2)
Etilnitrosourea causa subexpresión de la subunidad de 7.6 kDa de la ARN polimerasa II en ovocitos fetales de ratón y disminuye los niveles generales de transcripción
Bonilla E, Mazo J
Idioma: Español
Referencias bibliográficas: 14
Paginas: 40-44
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RESUMEN
Etilnitrosourea (ENU) es un agente alquilante que causa anormalidades congénitas en los fetos cuando se administra a hembras gestantes. Se ha determinado que ENU es capaz de inducir apoptosis y detener el crecimiento de órganos y tejidos fetales inmediatamente después de ser administrado. Aunque las propiedades mutagénicas de ENU son bien conocidas, poco se conoce acerca de sus efectos a nivel de la transcripción celular. En el presente estudio se evaluó el efecto de este agente en la sobrevivencia de ovocitos fetales de ratón cultivados
in vitro, y se analizaron sus alteraciones en la expresión génica. Una concentración de 1 mM de ENU diminuyó la sobrevivencia de los ovocitos en cultivo al 70% después de 24 h de exposición. El ARNm de los ovocitos control y tratados con ENU fue retrotranscrito, se elongaron los extremos 3’ del ADNc generado con residuos de desoxiadenosina, y éste fue amplificado mediante PCR. La cantidad de ADNc formado a partir de 10 ovocitos tratados con ENU fue, en promedio, 5 veces menor a la formada a partir del mismo número de ovocitos control. El análisis diferencial de la expresión génica a partir de 6,000 clones mostró un solo clon correspondiente con un gen subexpresado en los ovocitos tratados con ENU. Este probablemente debido a la subexpresión de la subunidad de 7.6 kDa de la ARN polimerasa II.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Douglas GR, Jiao J, Gingerich JD, Gossen JA, Soper LM. Temporal and molecular characteristics of mutations induced by ethylnitrosourea in germ cells isolated from seminiferous tubules and in spermatozoa of lacZ transgenic mice. Proc Natl Acad Sci USA 1995; 92: 7485-9.
Katayama K, Ishigami N, Uetsuka K, Nakayama H, Doi K. Ethylnitrosourea (ENU)-induced apoptosis in the rat fetal tissues. Histol Histopathol 2000; 15: 707-11.
Katayama K, Uetsuka K, Ishigami N, Nakayama H, Doi K. Apoptotic cell death and cell proliferative activity in the rat fetal central nervous system from dams administered with ethylnitrosourea (ENU). Histol Histopathol 2001; 16: 79-85.
Iona S, Klinger FG, Sisti R, Ciccalese R, Nunziata A, De Felici M. A comparative study of cytotoxic effects of N-ethyl-N-nitrosourea, adriamycin, and mono-(2-ethylhexyl) phthalate on mouse primordial germ cells. Cell Biol Toxicol 2002; 18: 131-45.
Suzuki T, Itoh S, Takemoto N, Yajima N, Miura M, Hayashi M, et al. Ethyl nitrosourea and methyl methanesulfonate mutagenicity in sperm and testicular germ cells of lacZ transgenic mice (muta mouse). Mutat Res 1997; 388: 155-63.
Bronstein SM, Cochrane JE, Craft TR, Swenberg JA, Skopek TR. Toxicity, mutagenicity, and mutational spectra of N-ethyl-N-nitrosourea in human cell lines with different DNA repair phenotypes. Cancer Res 1991; 51: 5188-97.
De Felici M, Dolci S. Cellular interactions of mouse fetal germ cells in in vitro systems. Curr Top Dev Biol 1987; 23: 147-62.
Bonilla E, Párraga M, López LA, Escolar F, del Mazo J. Cuantificación de la expresión génica a partir de un número limitado de células mediante RT-PCR en tiempo real. Bioquimia 2002; 27: 2-6.
Bonilla E, del Mazo J. Deregulation of gene expression in fetal oocytes exposed to doxorubicin. Biochem Pharmacol 2003; 65: 1701-7.
Sambrok J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular cloning. A laboratory manual. 2nd ed. Cold Spring Harbor (NY): Cold Spring Harbor Laboratory Press; 1989.
Sanger F, Nicklen S, Coulson R. DNA sequencing with chain-terminating inhibitors. Proc Natl Acad Sci USA 1977; 74: 5463-67.
Katayama K, Ohtsuka R, Takai H, Nakayama H, Doi K. Expression of p53 and its transcriptional target genes mRNAs in the ethylnitrosourea-induced apoptosis and cell cycle arrest in the fetal central nervous system. Histol Histopathol 2002; 17: 715-20.
Katayama K, Ueno M, Yamauchi H, Nakayama H, Doi K. Ethylnitrosourea-induced apoptosis in primordial germ cells of the rat fetus. Exp Toxicol Pathol 2002; 54: 193-6.
Shibuya T, Morimoto K. A review of the genotoxicity of 1-ethyl-1-nitrosourea. Mutat Res 1993; 297: 3-38.