1997, Número 1
DIG-ELISA: Estandarización y evaluación serodiagnóstica en fasciolosis bovina experimental y natural
Ibarra VF, Montenegro CN, Vera MY, Boulard C, Quiroz RH, Bautista GCR, Vázquez PC
Idioma: Español/Inglés
Referencias bibliográficas: 23
Paginas: 7-12
Archivo PDF: 459.74 Kb.
RESUMEN
Los objetivos del presente estudio fueron: Determinar la sensibilidad y especificidad de DIG-ELISA y establecer el valor de corte para realizar diagnóstico de fasciolosis bovina; determinar la capacidad diagnóstica de la prueba en bovinos infectados en forma experimental; valorar la seroprevalencia bimensual y durante un año de los títulos IgG
anti-Fasciola hepatica en sueros de bovinos infectados en forma natural; y comparar la variación con la presencia de huevos del trematodo identificados en el análisis coproparasitoscópico. Con el propósito de estandarizar la prueba, además de las correspondientes titulaciones de sueros, antígeno y conjugado, se utilizaron 80 sueros de bovinos, de estos últimos 40 pertenecían a animales provenientes del estado de Sonora (zona libre de fasciolosis) y 40 del estado de Hidalgo (zona enzoótica de fasciolosis). La prueba mostró una sensibilidad de 97.5% y una especificidad de 80.0%, obteniendo un valor de corte de 7 mm. En otro estudio, se infectaron 15 bovinos jóvenes de sexo indistinto, cada uno con 600 metacercarias de
Fasciola hepatica. Los animales fueron sangrados semanalmente y durante 14 ocasiones para obtención de suero. La prueba fue capaz de detectar anticuerpos anti-
F. hepatica desde la segunda semana posinfección, logrando sus mayores incrementos expresados en diámetro de la zona de reacción (DZR) entre la séptima y décima semanas. En otro experimento se utilizaron 85 bovinos criollos, hembras, de un rancho ubicado en un área enzoótica de fasciolosis en Nautla, Veracruz, en donde se colectó sangre para obtención de suero, así como heces de cada uno de los bovinos. Los animales fueron muestreados bimensualmente y durante un año para correr los sueros con DIG-ELISA y las heces para realizar análisis por sedimentación. Los porcentajes de seroprevalencia fueron del 58%, 73%, 80%, 100%, 96% y 79% para los meses de marzo, mayo, julio, septiembre, enero y marzo, respectivamente, mostrando porcentajes de positividad similares a aquellos obtenidos en el análisis coproparasitoscópico (P › 0.01). Se concluye que DIG-ELISA mostró alta sensibilidad y fácil montaje para utilizarse bajo condiciones de campo en el diagnóstico temprano de fasciolosis bovina, generando resultados reproducibles que pueden ser de gran utilidad para estudios seroepidemiológicos.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Arriaga-Morilla de, C., Paniagua, R., Ruiz-Navarrete, A., Bautista, C. and Morilla, A.: Comparison of dot enzimelinked immunosorbent assay (Dot-ELISA), passive haemaaglutination test (PHT) and thin layer immunoassay (TIA) in the diagnosis of natural or experimental Fasciola hepatica infections in sheep. Vet. Parasitol., 30:197-203 (1989).
Bautista-Garfias, C.R., LopezArellano, M.E. y Sanchez, A.A.: A new method for serodiagnosis of sheep fascioliasis using helminth excretory-secretory products. Parasitol. Res., 76: 135137 (1985).
Benedek, L.: Examination of liver fluke eggs with sedimentation technique. Allatorov lapak, 66:139-140 (1946).
Benex, J.: Etude comparative de diverses méthodes de diagnostic immunoloque de fasciolose hepato-biliaire experimentale du mouton et influence du traitement sur la persistence des anticorps. Bull. Sac. Path. exot., 66.: 116-118 (1973).
Blancou, J., Bouchet, A. et Daynes, D.: Etude sur L’allergie, les cours d L’infestation des bovines par Fasciola hepatica. Rev. Elev. Méd. Pays trops., 24: 373-376 (1971).
Boulard, C., Bouvry, M. et Argente, G.: Comparaison de la détection des foyers de fasciolose par test ELISA sur lactoserum et serum et par coproscopie. Ann. Rech. Vet., 16: 363-368 (1985).
Burden, D.J. and Hammet, N.C.: Microplate enzyme linked immunosorbent assay for antibody to Fasciola hepatica in cattle. Vet. Rec., 103:158-162 (1978).
Burr-Foster, Q.: Analysis of variance. In: Design of Experiments: A Realistic Approach. 5th ed. Edited by: Anderson, V.H., McLean, R.A., 46-64. Marcel-Decker, New York, 1974.
Encinas, G.R., Quiroz, R.H., Guerrero, C. y Ochoa, G.P.: Frecuencia de fasciolosis hepatica e impacto económico en bovinos sacrificados en el rastro de Ferrería, México, D.F. Vet. Méx., 20:423-426 (1989).
Engvall, E. and Perlmann, P.: Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA. J. Immunol., 109: 129-135 (1972).
Fagbemi, B.O. and Obarisiagbon, I.O.: Comparative evaluation of the enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) in the diagnosis of natural Fasciola gigantica infection in cattle. Vet. Q.J.,12: 35-39 (1990).
Farrel, C.J., Shen, D.T. and Lang, B.Z.: An enzyme immunosorbent assay for diagnosis of Fasciola hepatica infection in cattle. Am. J. vet. Res., 42: 237-241 (1981).
Fernández, R.M., Bautista, C.R. e Ibarra, V.F.: Evaluación prueba de DIG-ELISA para la deteción de anticuerpos anti-Fasciola hepatica en ganado bovino. Parasitol. Día, 19:4-9 (1985).
Hillyer, G.V.: Use of counterelectrophoresis to detect infections of Fasciola hepatica. J. Parasitol., 61:337-339 (1975).
Hillyer, G.V., Sanchez, Z. and Leon de, D.: Immunodiagnosis of bovine fascioliasis by enzyme-linked immunosorbent assay and immunoprecipitation methods. J. Parasitol, 91: 449-454 (1985).
Jemli, M.H., Dorchies, P. et Magnaval, J.F.: Application de la technique ELISA au diagnostic immunologique de la fasciolose ovine: Comparaison avec L’immunofluorescence indirecte et la double diffusion en gelose. Rev. Méd. Vét., 138:355-359 (1987).
Maddison, S.E.: Serodiagnosis of parasitic diseases. Clin. Microbiol. Rev., 4:457-469 (1991).
Quiroz-Romero, H.: Parasitología y Enfermedades Parasitarias de Animales Domésticos. Limusa, Mexico, D.F., 1984.
Rangel, LJ. y Martínez, E.: Pérdidas económicas por decomiso de hígados y distribución geográfica de la fasciolosis bovina en el Estado de Tabasco, México. Vet. Méx., 25:327-331 (1994).
Shaheen, H.I., Kamal, K.A., Farid, Z., Mansour, N., Boctor, F.N. and Woody, J.: Dotenzyme-linked immunosorbent assay (Dot-ELISA) for the rapid diagnosis of human fascioliasis. J. Parasitol., 75: 549-552 (1989).
Thorner, R.M. and Remein, B.A.: Principles and Procedure the Evaluation of Screening for Disease. Public Health Me graph No. 67. Publication No. 846. United States Government Printing Office, Washington, D.C., 1961.
Wescott, R.B., Farrel, C.J. and Shen, D.T.: Diagnosis of naturally occurred Fasciola hepatica infections in cattle with an enzyme-linked immunosorbent assay. Am. J. vet. Res., 45:178-179 (1984).
Zimmerman, G.L., Jen, L.W., Cerro, J.E., Farnsworth, K.L. and Wescott, L.B.: Diagnosis of Fasciola hepatica infections in sheep by an enzyme-linked-immunosorbent assay. Am. J vet. Res., 2097-2100 (1982).