1998, Número 3
Diagnóstico de ileítis porcina por medio de la reacción en cadena de la polimerasa
García CL, Socci EG, Barrón FL, Arriaga DC, Morilla GA
Idioma: Español/Inglés
Referencias bibliográficas: 11
Paginas: 263-267
Archivo PDF: 855.80 Kb.
RESUMEN
La ileítis porcina es una enfermedad que ocasiona importantes pérdidas económicas a la industria porcina. El agente causal de esta enfermedad es
Lawsonia intracellularis, un microorganismo de difícil cultivo. Por esta razón, el diagnóstico generalmente se realiza sólo al sacrificio. Debido a la dificultad del diagnóstico en animales vivos, se han desarrollado técnicas para detectar el ADN de la
L. intracellularis por medio de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). El objetivo de este trabajo fue evaluar la técnica de PCR para el diagnóstico de la ileítis porcina en muestras de mucosa intestinal y heces de cerdos sospechosos de la enfermedad. El ADN fue extraído usando tierras diatomeas y tiocianato de guanidina. Para la amplificación del ADN se utilizaron oligonucleótidos específicos que amplifican un fragmento de ADN de
L. intracellularis de 319 pb. La estandarización de la técnica se realizó a partir de mucosa intestinal de un cerdo infectado experimentalmente. La mínima cantidad de ADN de mucosa infectada que se detectó por PCR fue de 3.72 ng. Cuando la mucosa infectada fue adicionada a muestras de heces normales se necesitaron 12.4 ng del ADN extraído, para obtener un producto de amplificación visible. El producto de amplificación esperado de 319 pb fue también obtenido de mucosa intestinal o muestras de heces de cerdos infectados con signos clínicos característicos de ileítis porcina. Se concluyó que la técnica de PCR puede ser muy útil para el diagnóstico de esta enfermedad y para la determinación de la prevalencia de la ileítis porcina en diferentes áreas.
REFERENCIAS (EN ESTE ARTÍCULO)
Gebhart CJ, Jones GF, McOrist S, Lawson G. Porcine proliferative enteropathy: etiology and pathogenesis. In: Cronje R, Allen D, editors. Leman Swine Conference. Volume 20. St Paul (MN): Veterinarian Continuing Education and Extension, University of Minnesota, 1993:139-141.
Stephano HA. Enteropatía proliferativa porcina en México. En: Morilla GA, Correa GP, Stephano HA, editores. Avances en enfermedades del cerdo. México (DF): Asociación Mexicana de Veterinarios Especialistas en Cerdos A.C., 1985:393-397.
Rowland AC, Lawson GHK. Porcine proliferative enteropathies. In: Leman AD, Straw BE, Mengeling WL, Allaire SA, Taylor DJ, editors. Diseases of swine. 7th ed. Ames (IA): Iowa State University Press, 1992:560-569.
McOrist S, Gebhart CJ, Boid R, Barns SM. Characterization of Lawsonia intracellularis gen. nov., sp. nov., the obligately intracellular bacterium of porcine proliferative enteropathy. Int J Sys Bacteriol 1995;45:820-825.
Lawson GHK, McOrist S, Jasni S, Mackie RA. Intracellular bacteria of porcine proliferative enteropathy: cultivation and maintenance in vitro. J Clin Microbiol 1993;31:1136-1142.
Lawson GHK, McOrist S, Rowland AC, McCartney E, Roberts L. Serological diagnosis of the porcine proliferative enteropathies: implications for aetiology and epidemiology. Vet Rec 1988;122:554-557.
Holyoake PK, Cutler RS, Caple IW, Monckton RP. Enzyme- linked immunosorbent assay for measuring Ileal Symbiont Intracellularis-specific immunoglobulin G response in sera of pigs. J Clin Microbiol 1994;32:1980-1985.
Jones GF, Ward GE, Murtaugh MP, Lin G, Gebhart CJ. Enhanced detection of intracellular organism of swine proliferative enteritis, Ileal Symbiont Intracellularis, in feces by polymerase chain reaction. J Clin Microbiol 1993;31:2611-2615.
McOrist S, Gebhart CJ, Lawson GHK. Polymerase chain reaction for diagnosis of porcine proliferative enteropathy. Vet Microbiol 1994;41:205-212.
Boom R, Sol CJA, Salimans MMM, Jansen CL, Wertheim-Van Dillen PME, Van der Noordaa J. Rapid and simple method for purification of nucleic acids. J Clin Microbiol 1990;28:495-503.
Gebhart CJ, Lin GF, McOrist SM, Lawson GHK, Murtaugh MP. Cloned DNA probes specific for the intracellular Campylobacter-like organism of porcine proliferative enteritis. J Clin Microbiol 1991;29:1011-1015.